高效降解羽毛蛋白菌株的筛选及初步鉴定

 2024-02-06 10:02

论文总字数:10859字

摘 要

将羽毛蛋白当做碳源、氮源,从长时间堆积腐烂羽毛的土壤中提炼出一株高效降解羽毛蛋白的菌株。通过对该菌株形态特征观察和理化实验测定,初步鉴定为解淀粉类芽孢杆菌。该菌能够降解完整的天然羽毛,具有广泛的应用前景。

关键词: 蛋白酶,解淀粉类芽孢杆菌,筛选,鉴定。

Abstract:The strain from environment soil was isolated by feather meal as its sole source of carbon and nitrogen. The strain was identified as Bacillus amyloliquefaciens based on morphology observation, physicochemical characteristics. The protease produced by this bacteria degraded natual feather without any treatment, and it has wide application prospect.

Keywords: protease, Bacillus amyloliquefaciens, screening, identification.

目 录

1 前言 4

2 材料 4

2.1 实验各种材料与仪器 5

2.2 土壤的原材料 5

2.3 试剂 5

2.4 培养基 6

3 实验方法 6

3.1 土壤悬液的制备与稀释 6

3.2 溶液配制 7

3.3 菌株的纯培养 7

3.4 可降解羽毛菌株的筛选 7

3.5 菌株保存 8

3.6 菌株形态的辨别与生理生化鉴定 9

4 结果与讨论 12

结 论 15

参 考 文 献 16

致 谢 17

前言

羽毛蛋白是由一种程度较高混合的二硫键组成的蛋白,很难被一般蛋白酶所降解,所以很难在体内被直接利用[1]。蒸煮和酸碱水解羽毛可以增加羽毛角蛋白消化吸收率。但是必须在在高温高压的条件下进行才可以[2.3]。现代环境下微生物降解法能提高羽毛饲料的作用并且保护环境,还可以得到高质量的产品。

随着我国农业与畜牧业的发展,如何开发出新型的蛋白质饲料资源替代其他资源的不足是目前研究的热点与重中之重[3]

一般的蛋白酶不能水解这种蛋白,但是角蛋白酶能特异性降解这种蛋白。在细菌、放线菌、真菌中有大量的角蛋白酶,所以能从多种微生物中得到这种角蛋白酶。角蛋白的生物降解非常环保经济[6]。使用生物发酵处理角蛋白不但可以除去环境的压力,降低能耗,还能够提供给禽畜类需要的物质,而且羽毛粉、新鲜的羽毛在微生物与角蛋白酶协同作用下,其中的羽毛蛋白非常容易降解,氨基酸不太容易被失去[7],将鸡蛋白的营养价值提升到了最高的程度。在工业中有着非常广泛的应用,许多应用和研究价值都很大。

羽毛中的许多角蛋白也内含众多重要有用的物质。据测定,羽毛角蛋白的比重在80%以上,并且包含许多生物所需的营养物质,认真处理这些羽毛角蛋白,以后会成为一种很好的饲料蛋白[8]。在当今社会中,许多废弃羽毛残料出现在我们的环境中,不断地开发养殖物残留下来的羽毛将作为一种蛋白资源能减轻环境的负担,还可以解决当前饲料工业中蛋白质能源不足的问题[9]

2 材料

2.1实验材料与仪器

名称

型号

生产厂家

电热恒温鼓风干燥箱

DHG-9240A

上海精密科学仪器有限公司

高压灭菌锅

MC-23

上海精密科学仪器有限公司

生化培养箱

SPX-2508型

上海跃进医疗器械厂

组合式全温摇床

HD-390型

太仓市博莱特实验仪器厂

pH计

868

热电(上海)仪器有限公司

名称

型号

生产厂家

高压灭菌锅

YXQ-LS-30SI

上海博迅实业有限公司

恒温磁力搅拌器

85-1

上海康华生化仪器制造有限公司

电子天平

TE612-L

北京赛多利斯仪器系统有限公司

单人单面净化工作台

SW-CJ-1FD

苏州净化设备有限公司

电炉

TD

巩义英峪予华仪器厂

微型旋涡混合仪

WH-3

上海沪西分析仪器厂有限公司

台式离心机

TDL-5-A

上海安亭科学仪器厂

可见分光光度计

722N

上海精密实验设备有限公司

2.2土壤原材料

在淮师食堂后方的食材处理区采集一部分的含有羽毛的土壤样品作为原材料。

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