液态牛奶蛋白质含量快速测定方法研究

论文总字数：16945字

摘 要

液态牛奶中蛋白质是牛奶的主要成分，也是评价液态牛奶质量的重要指标之一。蛋白质含量测定的方法，是生物化学研究中最常用、最基本的分析方法之一。目前液态牛奶中蛋白质含量检测方法有考马斯亮蓝法、凯氏定氮法、紫外吸收法、双缩脲法、福林酚试剂法、杜马斯定氮法、甲醛滴定法等。本次实验将主要通过考马斯亮蓝法和凯氏定氮法对多种液态牛奶中蛋白质的含量进行检测以及测定过期牛奶和添加含氮干扰物的牛奶。考马斯亮蓝法中，基于595nm处蛋白质含量与其吸光度值成正比关系，以牛血清白蛋白为标准蛋白，绘制出标准曲线。测定出多种牛奶在595nm处的吸光度值，以此检测出液态牛奶中蛋白质的含量。凯氏定氮法中，通过消化、吸收、蒸馏、滴定四个步骤，通过测定氨气的含量来检测出液态牛奶中蛋白质的含量。通过对检测方法原理、优缺点、试用条件的探究与分析，建立一个能够快速、精准检测出液态牛奶中蛋白质含量的方法。

关键词： 液态牛奶；蛋白质；干扰物；考马斯亮蓝法；凯氏定氮法

Abstract

In the liquid state milk protein is the main component of milk, it is also one of important index to evaluate the quality of the liquid milk. Method for the determination of protein content, is the most commonly used in biochemical research, one of the most basic analysis method. At present in the liquid state milk protein content detection method with coomassie brilliant blue method and kjeldahl determination, ultraviolet absorption method, biuret method, the forint phenol reagent method, dumas nitrogen determination method, formaldehyde titration method, etc. This design will mainly through coomassie brilliant blue method and kjeldahl determination of protein content in a variety of liquid milk for testing. And by measuring the overdue milk and add in the milk to determine the content of protein nitrogen distractors. Coomassie brilliant blue method, based on the 595 nm is proportional to the relationship between protein content and its absorbance values, on the basis of bovine albumin protein, draw standard curve. Determine the variety of milk at 595 nm absorbance value, and to detect the protein content in the liquid state milk. Kjeldahl determination, through digestion and absorption, distillation, titration four steps, by determining the amount of ammonia to detect the liquid content of protein in milk. Through the principle, advantages and disadvantages, the trial conditions of the test methods of inquiry and analysis, to establish a can quickly and accurately detect the liquid state milk protein content in the method.

Keywords：liquid milk；proteins ；Coomassie ；brilliant blue method； Kjeldahl determination

目 录

摘 要 I

Abstract II

第一章 文献综述 1

1.1蛋白质简介 1

1.2目前检测蛋白质含量方法的现状 1

1.2.1考马斯亮蓝法（Bradford法） 1

1.2.2、凯氏（KielDah）定氮法 1

1.2.3、紫外吸收法 2

1.2.4、双缩脲法 2

1.2.5、福林-酚试剂法 2

1.2.6、甲醛滴定法 3

1.2.7、杜马斯定氮法 3

1.3选题背景与意义 3

第二章 实验方法 5

2.1实验试剂 5

2.2实验仪器 6

2.3 溶液的配制 6

2.4.1标准曲线的制作 6

2.4.2精密度试验 7

2.4.3稳定性试验 7

2.4.4测定液态牛奶中蛋白质含量 7

2.5凯氏定氮法操作步骤 7

2.5.1蛋白质含量的测定 7

2.5.2 精密度试验 8

2.6 过期牛奶蛋白质含量测定 8

2.7添加含氮干扰物测定蛋白质含量 8

2.7.1考马斯亮蓝法检测干扰物 9

2.7.2凯氏定氮法检测干扰物 9

第三章 实验结果与分析 10

3.1不同蛋白质标准溶液的吸光度 10

3.2标准曲线的绘制 10

3.3精密度试验 11

3.4稳定性试验 11

3.5各牛奶中蛋白质含量 11

3.6过期牛奶中蛋白质含量 12

3.7添加干扰物试验 13

3.7.1考马斯亮蓝法测定结果 13

3.7.1.1 未过期牛奶测定结果 13

3.8.2凯氏定氮法测定结果 15

3.8.2.1未过期牛奶测定结果 15

第四章 结 论 17

4.1全文总结 17

4.2 下一步工作的提议 17

致 谢 18

参考文献 19

1. 文献综述

1.1蛋白质简介

蛋白质的结构通式：HOOC-CH(R)-NH2，R基团表示侧链基团

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